過表達(dá)腺病毒包裝

簡要描述：過表達(dá)腺病毒包裝腺病毒是一種線性雙鏈DNA無包膜病毒，對分裂期細(xì)胞和非分裂期細(xì)胞均具有感染能力，且具有嗜上皮細(xì)胞性。重組腺病毒載體是以腺病毒為基礎(chǔ)發(fā)展起來的工具病毒載體，它可通過受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，但腺病毒基因組不整合進(jìn)入宿主細(xì)胞基因組中。腺病毒作為一種常用的基因操作工具，在心血管、肝臟、肌肉、肺、腫瘤及其他領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。

更新時間：2024-06-17
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腺病毒（Adenovirus）是直徑約80-120 nm的無包膜的線性雙鏈DNA病毒，可迅速感染分裂和非分裂期細(xì)胞，與細(xì)胞表面受體結(jié)合后通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞，在細(xì)胞核孔附近聚集，并在感染后2h將腺病毒的DNA釋放到細(xì)胞核中并開始蛋白表達(dá)。通過對野生腺病毒進(jìn)行改造，保留包裝信號序列，去除病毒蛋白的編碼序列，不僅增加外源基因的裝載容量，而且降低細(xì)胞毒性和機(jī)體免疫反應(yīng)，從而獲得安全性更高的基因?qū)胂到y(tǒng)。

腺病毒包裝系統(tǒng)的特點：不整合到宿主細(xì)胞基因組、無插入致突變性、可進(jìn)行有效擴(kuò)增、獲得高滴度高純度的腺病毒。

腺病毒的優(yōu)勢

1. 是研究原代非增殖細(xì)胞基因表達(dá)的最佳系統(tǒng)：腺病毒感染細(xì)胞后，1-2天即可表達(dá)，是研究原代非增殖細(xì)胞基因表達(dá)的最佳系統(tǒng)。

2. 滴度高：腺病毒系統(tǒng)在轉(zhuǎn)有E1基因的HEK293細(xì)胞中可進(jìn)行自我復(fù)制，可產(chǎn)生滴度為10¹⁰~10¹¹PFU/mL的病毒。

3. 載體容量大：可容納不超過5kb的片段。

4. 不整合到染色體中，無插入致突變性：腺病毒除卵細(xì)胞以外，幾乎在所有已知細(xì)胞中都不整合到染色體中，因此避免了因整合而引發(fā)的潛在的基因突變和隨機(jī)效應(yīng)。

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