上海交通大學(xué)藥學(xué)院OVA誘導(dǎo)哮喘動物模型介紹

哮喘的發(fā)生發(fā)展與遺傳、免疫、環(huán)境和藥物作用等有關(guān)，其誘發(fā)因素包括過敏原、  病毒感染、刺激物、運動等。 其病理特點為Th2淋巴細(xì)胞免疫反應(yīng)強， IL-4、 IL-5、 IL-13增強，導(dǎo)致嗜酸性粒細(xì)胞浸潤增多、粘液分泌增多、支氣管高反應(yīng)性(BHR)、 免疫球蛋白E (IgE)合成和組織重塑。 臨床表現(xiàn)為氣喘、胸悶、咳嗽等癥狀，多發(fā)生 在夜間或凌晨，因此建立可靠的哮喘動物模型對于探究哮喘的發(fā)病機制，發(fā)現(xiàn)藥物 作用靶點具有重要意義。

目前哮喘模型選取的動物主要用BALB/c 小鼠、C57小鼠、  SD 大鼠、  Wistar 大鼠和 豚鼠等。用于誘導(dǎo)哮喘的誘導(dǎo)劑包括卵清蛋白（ OVA），塵螨、豚草、曲霉屬真菌   混合物（ DRA）,屋塵螨（ HDM ）等，其中OVA*為應(yīng)用。常用的造模方式包括氣 管給藥、鼻腔滴入、霧化吸入等。

檢測指標(biāo)

肺泡灌洗液

1. 各組總細(xì)胞數(shù)的變化

2. 各組總蛋白濃度的變化

3.  ELISA檢測哮喘相關(guān)細(xì)胞因子：IL-4,IL-5,IL-13等變化

在OVA造模組，肺泡灌洗液中蛋白總量以及細(xì)胞的總數(shù)明顯增加，藥物作用 后，蛋白總量和細(xì)胞總數(shù)均有所減少，說明藥物作用之后哮喘得到緩解。

流式檢測各組嗜酸性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞比例的變化

OVA未造模組肺泡灌洗液主要是巨噬細(xì)胞， OVA造模之后，嗜酸性粒細(xì)胞顯 著增加，巨噬細(xì)胞減少。在OVA造模組，藥物作用之后，嗜酸性粒細(xì)胞未明 顯增加，巨噬細(xì)胞未明顯減少。

血清

1. 各組總Ig E的變化

2. 各組OVA特異性Ig E的變化

肺組織

1. Western blot  檢測各組蛋白的變化，如Muc5ac, Fizz, Arg 等

2. q-PCR 檢測各組mRNA的變化，如IL-4,IL-5, IL- 13, IL-25, TSLP, GM-CSF等。

3. H&E 染色檢測各組炎性細(xì)胞浸潤的變化

4. PAS 染色檢測各組糖原產(chǎn)生的變化

相關(guān)參考文獻(xiàn)：

AMFR drives allergic asthma development by promoting alveolar macrophage–derived GM-CSF production.